细胞养了那么久,还搞不清楚细胞抱团的原因?

发表时间:2023-04-26 15:15

您是否总是遇到细胞抱团的现象?

您是否总是因为搞不清楚细胞抱团原因而困惑?

您是否总是因为难以将抱团细胞拯救回来而抓狂?

伙伴们,快来拯救你们的细胞 ,今天给大家从四个层面剖析细胞抱团的真实原因,快来围观吧!

一、细胞本身生长特性有抱团倾向

有些细胞本身有抱团生长的特性,给大家看5种喜欢抱团的细胞类型:

细胞类型1:NCI-H716 人结直肠腺癌细胞

形态:淋巴母细胞样

生长特性:悬浮生长

细胞喜欢在悬浮液中呈葡萄状聚集,抱团细胞粒粒饱满

2023.4.26-1.png

细胞类型2:Caco-2人结直肠腺癌细胞

形态:上皮样

生长特性:贴壁生长

此细胞喜欢贴壁成片分布,呈融合状,细胞个头大小不匀

2023.4.26-2.png

细胞类型3:CaLu-3 人肺癌细胞

形态:上皮样

生长特性:贴壁生长

此细胞也是喜欢聚集分布,呈片状,片状之间有空白

2023.4.26-3.png

细胞类型4:SH-SY5Y人神经母细胞瘤细胞

形态:上皮样

生长特性:贴壁和悬浮生长

此细胞贴壁居多,有轻微的抱团倾向

2023.4.26-4.png

细胞类型5:BT-474人乳腺癌细胞

形态:上皮样

生长特性:贴壁、片状生长

此细胞也是喜欢片状生长

2023.4.26-5.png

看了这么多喜欢抱团的细胞类型,也会有喜欢分散生长的细胞类型吧,来给大家展示2种细胞类型:

细胞类型1:MSC(人源脂肪来源)

形态:成纤维样

生长特性:贴壁生长

此细胞成纤维样,均匀分布,平铺皿底,不留空隙

2023.4.26-6.png

细胞类型2:HEF小儿包皮成纤维细胞(人源脂肪来源)

形态:成纤维样

生长特性:贴壁生长

此细胞也是喜欢分散生长,均匀分布

2023.4.26-7.png

Q:如何区分细胞抱团正不正常?

A:看了这些细胞形态,不知您是否和我有一个共鸣:大多数上皮样或神经母细胞瘤样的细胞更喜欢抱团生长,而大多数成纤维样细胞更喜欢分散、均匀生长。

又有一个问题来了,那就是我们如何区分细胞抱团正不正常。

这里开始划重点了,大家看好了:

1.如果细胞本身是分散生长,结果抱团严重,说明细胞“生病”了,我们要给细胞“诊治”。

2.如果本身生长特性就有抱团的细胞,如何判断它的抱团正不正常呢?

独门秘诀告诉您,细胞哪怕是抱团了,也是“粒粒饱满,棱角分明”的,回头看看上面抱团的细胞,是不是细胞之间有明确的“分界线”,这说明它们抱在一起很健康,很Happy;而异常的细胞抱团,你是观察不到细胞之间的“界限”的,细胞形态也不规则,边缘模糊,远远看去,抱团的细胞像“一团浆糊”。

二、细胞老化☑更容易抱团

细胞类型:MSC(人源脐带来源第6代)

形态:成纤维样

生长特性:贴壁生长

2023.4.26-8.png

如图所示:

人脐带来源第6代的间充质干细胞,白色箭头指示的是发生细胞老化的MSC细胞,β-半乳糖苷酶染色阳性,染上蓝色。由图片可以看出老化细胞体积增大、细胞扁平。白圈圈起来的是聚团细胞,老化细胞容易聚团生长,状态变差。

三、血清批间差☑可能导致细胞抱团

那么问题来了,血清为何有批间差?

因为血清来源于动物,其组成成分有1000种左右,且血清组成及含量常随供血动物的年龄、生理条件和营养条件而异。每个批号的组分百分比含量都是不固定的,所以批间差异是存在的。

2023.4.26-9.png

血清批间差可能会导致细胞抱团

如图所示,大鼠心肌细胞在更换了新批次的血清之后,随着传代次数的增加,抱团明显。正常低密度下,细胞舒展开来,均匀分散,但异常的的细胞会呈现聚集生长状态,高密度下正常细胞像铺路石一样均匀铺满,不留空隙,但高密度下异常的细胞,形态模糊,难以辨认,像四川九寨沟一样的沟壑重生。

四、胰酶消化不当☑容易导致细胞抱团

2023.4.26-10.png

HEK 293细胞

导致细胞抱团的第一种情况是胰酶消化操作不当。

如果您经常遇到传代的细胞贴壁后老是贴壁不匀,成片分布,抱团生长,来看看你有没有注意这几个细节噢。

1、如图所示,HEK 293因消化过度或吹打过猛导致细胞受伤严重,破损的细胞碎片容易粘连抱团;

2、消化时细胞融合率太高,成片脱落,将不容易被吹散,容易抱团,我们建议细胞融合率达到80%传代为佳;

3、吹打力度不足,难以将成片脱落的细胞吹散,容易抱团。

导致细胞抱团的第二种情况是细胞对胰酶消化强度和纯度的敏感性。

1.细胞对胰酶消化强度的敏感性。绝大多数细胞都可以适应普通胰酶。这里的EDTA能螯合掉培养液中的Ca2+、Mg2+,加快细胞与皿底以及细胞之间的分离速度。但有极少部分细胞对胰酶消化强度很敏感,需要不含EDTA的胰蛋白酶,例如:大鼠肺泡二型上皮细胞。

2.细胞对胰酶纯度的敏感性。胰蛋白酶主要是从猪的胰脏提取,纯化获得的结晶,再制成的冻干制剂。正是因为其是提取物,故纯度无法媲美重组胰酶,含有的杂酶比如羧肽酶对细胞有伤害,敏感的细胞类型如神经元类:小鼠海马神经元HT22;干细胞类:胚干,诱导干;间充质干需要用重组胰酶消化。

【 声明 】素材均取材于互联网,仅供参考

免责声明:郧洋生物转载在于传递更多信息,文章版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权和其它问题,请跟我们联系删除!文章内容为作者个人观点,并不代表郧洋生物赞同或支持其观点。郧洋生物拥有对此声明的最终解释权。

分享到:
血清系列
浙江郧洋生物科技有限公司
Copyright © 2018-2022 zhejiangyunyang.com . All Rights Reserved
网站建设:沐月比希(浙江)信息技术有限公司
地址:浙江省杭州市西湖区金蓬街321号2号楼A座6楼
邮箱:2311751969@qq.com
电话:杨经理:13606504318   胡经理:15695883307  

细胞工厂
郧洋生物公众号